本试剂盒专门用于科学研究目的，严禁用于医学诊断。本文介绍了人巨噬细胞炎性蛋白5（MIP-5）ELISA试剂盒的检测原理及使用方法。

检测原理

本试剂盒采用双抗体一步夹心法进行酶联免疫吸附试验（ELISA）。首先，预先包被adropin（AD）抗体的微孔中，依次加入样本、标准品和HRP标记的检测抗体，经过温育和彻底洗涤后，加入底物TMB进行显色反应。在过氧化物酶的催化下，TMB转化为蓝色，随后在酸的作用下变为最终的黄色。显色的深浅与样品中adropin（AD）的浓度成正相关。最终，在450nm波长下使用酶标仪测定吸光度（OD值），以此计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法

1. 血清：使用无热原和内毒素的试管，操作时避免一切细胞刺激。收集血液后，3000转/分钟离心10分钟，以迅速小心地分离血清与红细胞。
2. 血浆：使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝，3000转/分钟离心30分钟后取上清。
3. 细胞上清液：3000转/分钟离心10分钟，以去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织与适量生理盐水混合捣碎，3000转/分钟离心10分钟后取上清。
5. 保存：如样本采集后未及时检测，建议按单次用量分装并冷冻保存于-20℃，避免反复冻融。样本在室温下解冻时，请确保均匀充分解冻。

自备物品与操作注意事项

本试剂盒的组成包括标准品（S0-S5），其浓度依次为：0、25、50、100、200、400pg/mL。

试剂的准备

对20×洗涤缓冲液进行稀释：使用蒸馏水以1:20的比例稀释，即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

洗板方法及结果判断

绘制标准曲线：在Excel中，以标准品浓度为横坐标，对应的OD值为纵坐标，绘制标准品的线性回归曲线，并根据曲线方程计算各样本浓度值。

免责声明

本试剂盒的性能数据仅供参考，具体应用请遵循相关标准及指南。使用[EVO视讯]品牌产品，您将获得更专业的科研支持与服务。